Miles Morales (Stimme im Original: Shameik Moore) ist wieder da und muss sich als Spider-Man, der freundlichen Spinne aus der Nachbarschaft, zusammen mit Gwen Stacy (Hailee Steinfeld) und einem neuen Team von Spider-People verbünden, um sich einem Bösewicht zu stellen, der mächtiger ist als alles, was ihnen bisher begegnet ist.